Contexte

Nos travaux visent à mieux comprendre les mécanismes de l’autolyse des bactéries lactiques, qui résulte de l’hydrolyse du peptidoglycane, composant majeur de la paroi des bactéries à Gram positif. L’autolyse permet de libérer le contenu intracellulaire bactérien dans le milieu environnant. Ainsi, la libération des enzymes intracellulaires impliquées dans le développement de la flaveur des fromages au cours de l’affinage intensifie leur action. Lorsque les bactéries lactiques sont utilisées comme vecteurs d’antigènes ou de molécules thérapeutiques dans le tractus digestif, leur libération in vivo pourrait également favoriser leur action.

Résultat

Nous avons identifié une quarantaine de muropeptides constituants du peptidoglycane de Lactococcus lactis. La technique d’HPLC classiquement utilisée a été modifiée pour permettre une identification plus rapide et plus sensible des muropeptides par spectrométrie de masse (Courtin et al., 2006). Cette technique a permis d’identifier une L,D-carboxypeptidase qui joue un rôle dans la maturation du peptidoglycane (Courtin et al., 2006). Nous avons également mis en évidence qu’une modification du peptidoglycane par dé-N-acétylation modifie la vitesse d’autolyse de L. lactis (Meyrand et al., soumis pour publication). En collaboration avec l’équipe de S. Kulakauskas (UBLO, INRA, Jouy-en-Josas), l’enzyme responsable de l’incorporation du D-Asp dans les ponts interpeptidiques du peptidoglycane a été caractérisée (Veiga et al., 2006).

Perspectives

Nos perspectives visent à transposer nos connaissances et notre savoir-faire sur le peptidoglycane dans le cas de bactéries lactiques commensales ou probiotiques en interaction avec l’hôte.

Bibliographie

Courtin, P., Miranda, G., Guillot, A., Wessner, F., Mezange, C., Domakova, E., Kulakauskas, S. & Chapot-Chartier, M. P. (2006). Peptidoglycan structure analysis of Lactococcus lactis reveals the presence of an L,D-carboxypeptidase involved in peptidoglycan maturation. J Bacteriol 188, 5293-5298.
Veiga, P., Piquet, S., Maisons, A., Furlan, S., Courtin, P., Chapot-Chartier, M. P. & Kulakauskas, S. (2006). Identification of an essential gene responsible for D-Asp incorporation in the Lactococcus lactis peptidoglycan crossbridge. Mol Microbiol, 1713-1724.

Contact

Marie-Pierre Chapot-Chartier (Marie-Pierre.Chapot@jouy.inra.fr), Tél : 01 34 65 22 68
Centre de Jouy en Josas
UR477 Biochimie bactérienne
Domaine de Vilvert
78352 Jouy-en-Josas Cedex